ARAHAN

mengenai penggunaan kit reagen untuk menentukan warna protein dalam air kencing dan cerebrospinal dengan pyrogallol merah

Kit termasuk:

200 ml (2 x 100 ml P + 2 x 2 ml calibrator)

500 ml (2 x 250 ml P + 2 x 5 ml calibrator)

Prinsip kaedah ini

Apabila protein berinteraksi dengan pyrogallol merah dan

natrium molybdate membentuk kompleks berwarna,

yang intensiti warna adalah berkadar dengan tumpuan

Kandungan Kit

Reagen (P) - penyelesaian pyrogallol merah dalam succinate

penampan sedia untuk digunakan.

Calibrator - Penyelesaian Protein Penentukuran Rendah (0.20

g / l, digunakan untuk menentukan microproteinuria) dan tinggi

(0.50 g / l, digunakan untuk menentukan proteinuria)

kepekatan protein mengandungi albumin 70% dan 30%

globulin sedia untuk digunakan.

Set storan - pada suhu 2-8 ° C dalam satu pakej

pengilang untuk seluruh hayat rak.

Kestabilan reagen dan calibrator

Setelah dibuka, reagen stabil selama 6 bulan, calibrators - 3 bulan. apabila disimpan dalam bentuk tertutup rapat pada suhu 2-8 ° C di tempat yang gelap.

Nilai normal

• air kencing - sehingga 0.120 g / l (sehingga 0.141 g / hari);
• cecair serebrospinal (CSF) - 0.150-0.450 g / l.

Sampel untuk analisis

Urine, CSF yang tidak terkubur.

Penyediaan untuk analisis

1. CSF dan air kencing disentri selama 10 minit pada 2700-4000 rpm.
2. Gunakan tiub bersih dan teliti untuk analisis. Ujian untuk kesesuaian tiub ujian untuk analisis adalah ketiadaan perubahan warna dalam reagen. Sekiranya reagen bertukar biru tanpa menambah sampel, keputusan penentuan protein akan ditaksir; Oleh itu, kembalikan reagen pertama dan kemudian tambah air kencing.
3. Apabila menubuhkan kaedah itu, cuvettes baru harus digunakan, kerana ia tidak ternoda dengan reagen dan sampel reaksi. Cuvettes plastik lama (keruh, tidak telus) tidak sesuai untuk pengukuran. Sebelum digunakan, elakkan cuvettes yang digunakan seperti berikut: cuti selama 10 minit dalam larutan pencuci (200 ml 5% penyelesaian hidrogen peroksida atau 1 ml detergen), kemudian bilas dengan paip dan air suling sekurang-kurangnya 10 kali. Kit ini sesuai untuk analisis pada penganalisis semi-automatik biokimia dan automatik.

Analisis Panjang gelombang: 598 (578-620) nm; panjang laluan optik: 10 mm; suhu: 18-25 ° C

Reagent dan calibrator perlu disimpan pada suhu bilik selama kira-kira 30 minit sebelum analisis.

Prosedur 1 (penentuan proteinuria)

Sampel untuk dicampur, simpan selama 10 minit pada suhu bilik (18-25 ° C). Ukur ketumpatan optik sampel eksperimen (E) dan penentukuran (Ek) terhadap sampel kawalan (kosong). Warna ini stabil selama 1 jam.

APAKAH KITA MENDAPATKAN DENGAN METODE URINE SULFOSALYCYL?

Di negara kita, kaedah turbidimetrik yang menggunakan asid sulfosalicylic (kaedah sulfosalicylic), yang pertama kali dicadangkan oleh Kingsbury F, digunakan terutamanya untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing. B. dan penulis bersama pada tahun 1926. Pada masa yang sama, makmal-makmal negara-negara maju hampir tidak menggunakan kaedah ini, hasilnya kawalan kualiti makmal analisis protein air menunjukkan penurunan pekali variasi. Oleh itu, pada tahun 1993, 60% daripada makmal diagnostik klinikal Perancis menjalankan penentuan kepekatan protein air kencing dengan menggunakan kaedah kolorimetrik menggunakan pewarna merah pyrogallol (kaedah pyrogallol) dan hanya 10% menggunakan kaedah sulfosalicylic. Kit diagnostik untuk menentukan protein kencing berasaskan kaedah pyrogallol dihasilkan oleh syarikat-syarikat terkenal seperti Bayer D diagnostik, Beckman, Biodirect, Biocon Diagnostik, Laboratorium Bio-Rad, Eurodiag, Kone, Merck, Randox, Serono, Sentinel CH, Sigma. Malangnya, di negara kita, atas sebab-sebab ekonomi dan sebahagiannya disebabkan kurangnya pengalaman, kaedah kolimetrik untuk menentukan protein air kencing masih digunakan sangat sedikit.

Persoalannya timbul - bagaimana wajar adalah penolakan makmal di negara maju daripada menggunakan kaedah yang mudah dan yang paling penting, murah. Untuk menjelaskan isu ini, kami membandingkan keputusan menentukan kepekatan protein dalam air kencing pesakit dengan dua kaedah: sulfosalicylic [1] dan pyrogallol [2].

Prosedur untuk mengukur kepekatan protein mengikut setiap kaedah adalah seperti berikut.

Reagen: larutan asid sulfosalicylic 3%, larutan natrium klorida 0.9%

Calibrator (penyelesaian penentukuran serum albumin, 50 g / l, larutan natrium klorida, 0.9% dan natrium azide, 0.095%) dari kit "Uni-Test - Total Protein" yang dihasilkan oleh "Diakon DS" Mengenai Unimed ".

Peralatan: spectrophotometer SF-2000 yang dihasilkan oleh OKB "Spectr".

Kursus pengukuran: 0.5 ml air kencing yang ditapis dan 1.5 ml larutan asid sulfosalicylic 3% ditambah kepada kuarza kuarza dengan panjang jalur optik 1 cm dan dikacau. Selepas 10 minit, ketumpatan optik diukur pada spektrofotometer pada panjang gelombang 595 nm terhadap sampel kosong (cuvette dengan 0.5 ml air kencing dan 1.5 ml larutan natrium klorida 0.9%). Pengiraan kepekatan protein dilakukan mengikut jadual penentukuran. Untuk pembinaannya, pelarut penyelesaian standard serum albumin manusia dalam larutan natrium klorida 0.9% dengan kepekatan: 0.025; 0.05; 0.1; 0.2; 0.3; 0.4; 0.5; 0.6; 0.7; 0.8; 0.9 g / l. Bagi setiap penyelesaian yang disediakan, pengukuran dilakukan dengan cara yang sama seperti sampel air kencing. Graf penentukuran ditunjukkan dalam Rajah 1.

Rajah. 1. Kurva penentukuran untuk penentuan protein dalam air kencing dengan kaedah sulfosalicylic.

Kit komersil yang dihasilkan oleh Biocon Diagnostik (Jerman) - Fluitest USP - Protein, kaedah ultra-sensitif berdasarkan kompleks merah pyrogallol-molybdate, digunakan.

Reagen: pyrogallol merah, 0.06 mmol / l, natrium molibdate, 0.04 mmol / l, penyangga succinate 50 mmol / l, pH 2.5, detergen 2%; Calibrator (penyelesaian penentukuran serum albumin, 50 g / l, larutan natrium klorida, 0.9% dan natrium azide, 0.095%) dari kit "Uni-Test - Total Protein" yang dihasilkan oleh "Diakon DS" Mengenai Unimed ". [3].

Peralatan: fotometer biokimia StatFax 1904 Plus ("Teknologi Kesedaran Inc.", Amerika Syarikat).

Kurva penentukuran untuk kaedah yang dijelaskan dengan nisbah sampel / reagen - 1 / 12.5 telah diperolehi menggunakan larutan albumin serum yang disediakan: 0.05; 0.4; 0.5; 0.6; 0.7; 0.8; 0.9; 1.0, g / l dengan mencairkan calibrator (50 g / l) dengan larutan natrium klorida 0.9%, (Gamb.2).

Rajah 2. Keluk penentukuran untuk kaedah merah pyrogallol, reagen Fluitest USP, Biocon Diagnostik (Jerman) dengan nisbah sampel / reagen 1 / 12.5.

80 μl diambil dari setiap larutan protein dan dicampur dengan 1.0 ml reagen; diukur sebagai sampel air kencing.

Rajah. 3. Gambarajah perbandingan hasil mengukur kandungan protein dalam sampel air kencing melalui kaedah sulfosalicylic dan pyrogallol.

Kurva penentukuran untuk reagen yang dihasilkan oleh Unimed A / O dan Biocon Diagnostik, dengan nisbah sampel / reagen sebanyak 1/30, diperoleh dengan menggunakan penyelesaian khas serum albumin: 0.05; 0.4; 0.5; 0.6; 0.7; 0.8; 0.9; 1.0, 1.1; 1.2; 1.3; 1.4; 1.5; 1.6; 1.7; 1.75; 1.8; 1.85; 1.9; 2.0 g / l dengan mencairkan calibrator (50 g / l) dengan larutan natrium klorida 0.9% (Gamb.4).

Rajah. 4. Keluk penentukuran untuk reagent Unimed A / O (graf atas) dan kit Fluitest USP dari Biocon Diagnostik (graf bawah) dengan nisbah sampel / reagen sebanyak 1/30.

50 μl diambil dari setiap larutan protein dan dicampurkan dengan 1.5 ml reagen dan diukur sebagai sampel air kencing.

Dalam kajian ini, untuk mencapai sensitiviti maksimum kaedah pyrogallol, varian yang sangat sensitif diubahsuai telah digunakan. Untuk ini, jumlah tambah air kencing telah meningkat. Kaedah pengukuran: 1 ml reagen utama ditambah kepada semua tiub, kemudian 80 μl air suling (kosong) ditambah ke tiub pertama, 80 μl air kencing yang dihancurkan telah dimasukkan ke dalam tiub yang selebihnya, diinkubasi pada suhu bilik selama 10 minit, dan ketumpatan optik sampel diukur terhadap kosong 600 nm panjang gelombang dan 650 nm penapis berbeza

Untuk membandingkan kaedah untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing, 60 sampel air kencing pesakit diukur oleh kaedah sulphosalicylic dan pyrogallol.

Kepekaan kaedah untuk mengukur protein dalam air kencing dinilai melalui pemeriksaan penyelesaian air berair yang disediakan mengandungi kepekatan albumin serum yang rendah (dari 0 hingga 0.05 g / l). Untuk kaedah pyrogallol dan sulfosalicylic, kami juga menyiasat nilai penyerapan tidak khusus kerana warna sampel air kencing. Untuk ini, ketumpatan optik sampel air kencing diukur, di mana, bukannya asid sulfosalicylic atau reagen pyrogallol, jumlah asin yang sama ditambah.

Untuk menilai kesan matriks (urin) terhadap keputusan kaedah sulfosalicylic, eksperimen berikut dilakukan.

1) Dalam sampel air kencing yang tidak mengandungi protein, menurut kaedah pyrogallol dan sulfosalicylic (n = 43), albumin serum manusia ditambah pada kepekatan akhir 0.4 g / l. Kemudian, menggunakan kaedah di atas, kepekatan protein dalam sampel yang disediakan ditentukan.

2) Contoh air kencing (n = 16), mempunyai protein mengikut kaedah pyrogallol, dicairkan dua kali dengan larutan natrium klorida 0.9%. Sampel yang diperolehi diperiksa semula melalui kaedah sulfosalicylic, kepekatan protein telah dikira semula untuk pencairan.

Hasil kajian dan perbincangan

Satu kajian sampel air kencing yang mengandungi kepekatan albumin tertentu menunjukkan bahawa kepekatan albumin minimum yang dikesan (kepekaan kaedah) adalah 0.033 g / l untuk kaedah sulfosalicylic, dan 0.012 g / l untuk kaedah pyrogallol.

Hasil pengukuran dalam bentuk gambarajah perbandingan hasil mengukur kandungan protein dalam sampel air kencing oleh sulfosalicylic (paksi ordinat) dan kaedah pyrogallol (paksi abyss) ditunjukkan pada Rajah 3. Garis serong padat pada graf sepadan dengan kesamaan hasil pengukuran dengan dua kaedah. Jika kedua-dua kaedah memberikan nilai yang sama, maka titik-titik pada graf itu perlu dikumpulkan berhampiran garis pepejal. Data yang ditunjukkan dalam Rajah. 3, kita juga boleh perhatikan bahawa kaedah sulfosalicylic secara konsisten menunjukkan kepekatan protein yang lebih rendah dalam semua sampel air kencing berbanding dengan kaedah pyrogallol.

Seperti yang ditunjukkan oleh kajian, antara hasil yang diperolehi menggunakan kaedah sulfosalicylic dan pyrogallol, tidak terdapat sambungan statistik yang meyakinkan. Di samping itu, berbanding dengan kaedah pyrogallol, kaedah sulfosalicylic dalam 95% sampel air kencing menunjukkan nilai kepekatan protein yang rendah. Pada masa yang sama, dalam 86% kes, pengukuran oleh kaedah sulfosalicylic memberikan hasil yang dianggap kurang dari dua kali atau lebih berbanding kaedah pyrogallol.

Pada masa yang sama, kaedah sulfosalicylic dalam sesetengah kes menunjukkan kehadiran protein dalam sampel kerana warna gelap atau kekeruhan yang meningkat dalam urin yang dikaji. Ia ditubuhkan bahawa dalam menentukan protein oleh kaedah sulfosalicylic (sampel / nisbah reagen = 1/3) pada panjang gelombang 595 nm, sumbangan sampel air kencing kerana warna atau kekeruhannya kepada hasilnya boleh dari 0 hingga 0.247 g / l (nilai purata - 0.031 g / l). Oleh itu, perlu diakui bahawa apabila menggunakan kaedah sulfosalicylic, penggunaan sampel kawalan (sampel air kencing + garam) untuk setiap sampel air kencing adalah mandatori. Apabila menentukan protein dengan kaedah pyrogallol, warna atau darjah kekeruhan sampel air kencing tidak menjejaskan hasilnya.

Eksperimen ke atas penilaian kesan matriks menunjukkan bahawa dalam hampir semua sampel air kencing yang disediakan mengandungi 0.4 g / l albumin, kepekatannya, ditentukan oleh kaedah sulfo-salisilik, adalah di bawah 0.4 g / l secara purata sebanyak 20% (nilai sempadan kepekatan protein 0,29-0,34 g / l). Pada masa yang sama apabila mengukur kepekatan protein dalam sampel ini Pyrogallol kaedah, keputusan bagi semua sampel adalah dalam 0,40-0,46 g / l. Selain itu, apabila menilai kesan matriks pada hasil mengukur kepekatan protein oleh kaedah sulfosalicylic, didapati bahawa dalam 5 daripada 16 sampel kencing yang dicairkan dua kali ganda, kepekatan protein adalah 15-33% lebih tinggi daripada sampel yang tidak dicairkan. Untuk penjelasan akhir kesan matriks pada keputusan kaedah sulfosalicylic, penyelidikan mengenai sejumlah besar sampel air kencing diperlukan.

Oleh itu, data yang diperoleh menunjukkan kelebihan kaedah pyrogallol melalui kaedah sulfosalicylic kerana sensitiviti dan kepekaan yang lebih tinggi untuk mengganggu faktor-faktor, tidak memerlukan sampel air kencing yang kosong, kemungkinan menggunakan satu standard untuk membina keluk penentukuran, dan sejumlah kecil air kencing untuk analisis. Kehadiran ciri-ciri sedemikian membolehkan kami mengesyorkan kaedah pyrogallol untuk kegunaan yang meluas dalam amalan makmal.

Dari data yang diperoleh, kesimpulan berikut: hasil mengukur kepekatan protein dalam air kencing dengan kaedah sulfosalicylic tidak dapat dibandingkan dengan hasil yang diperolehi oleh kaedah pyrogallol. Fakta ini adalah jawapan kepada soalan - mengapa makmal negara maju tidak menggunakan kaedah sulfosalicylic. Penerapan kaedah ini di negara-negara terbelakang, nampaknya, dijelaskan oleh fakta bahawa terdapat faktor harga yang berlaku atas ketepatan dan makna diagnostik hasil yang diperoleh, dan, memandangkan angka-angka yang dibentangkan dalam rajah. 3 keputusan, boleh dikatakan, dan lebih akal. Siapa yang memerlukan analisis sedemikian, apabila pada kepekatan protein dalam urin 0.3 g / l, hasil pengukuran boleh dari 0.05 hingga 0.25 g / l? Adapun faktor harga, maka, seperti yang anda ketahui, si miser membayar dua kali. Hasil analisis yang salah membawa kepada diagnosis salah dan rawatan tidak berkesan pesakit. Bahaya utama menggunakan kaedah sulfosalicylic adalah kita mendapat nilai yang sangat rendah dan jarang meresap proteinuria. Oleh itu, kaedah ini tidak boleh digunakan walaupun untuk pemeriksaan.

Jadi apa yang kita sukai dengan kaedah sulfosalicylic? Cara turbidimetric tergolong dalam kelas, yang berdasarkan kepada pengukuran perubahan pemindahan cahaya (D D) campuran tindak balas yang disebabkan oleh penyerakan cahaya (pembentukan kekeruhan). Dalam kes pengesanan protein di dalam air kencing, kekeruhan dibentuk kerana proses berikut: molekul protein air kencing dalam medium berasid adalah denatured, bergerak dari bentuk globular padat ke bentuk "filamen" longgar. Pada masa yang sama, keupayaan pembentukan konglomerat meningkat dengan ketara (reaksi hujan) dalam protein. Molekul protein individu lebih kecil daripada panjang cahaya cahaya yang kelihatan dan oleh itu sangat lemah menyebarkannya. Kecekapan kenaikan berselerak mendadak apabila saiz yang terhasil konglomerat molekul protein, menghampiri nilai 0.6 mikron (panjang gelombang rasuk menyelesaikan sesuatu). Semakin besar kepekatan protein dalam air kencing, semakin besar bilangan konglomerat (pusat penyebaran) terbentuk. Walau bagaimanapun, hubungan antara ketumpatan optik D D diukur pada satu fotometer dan kepekatan protein dalam air kencing adalah sangat kompleks. Pada peringkat awal tindak balas, sejumlah zarah protein kecil terbentuk, maka mereka mula melekat bersama-sama menjadi zarah yang lebih besar, sementara kepekatan pusat penyebaran berkurang, dan kecekapan (seksyen salib) penyebaran setiap pusat meningkat. Pada bila-bila masa, kami mempunyai campuran tindak balas beberapa pusat penyebaran dengan saiz yang berbeza. Pada kepekatan tinggi protein dalam air kencing boleh membentuk zarah protein besar yang mendakan, yang mengakibatkan pengurangan ketumpatan optik campuran reaksi.

Proses denaturasi protein dan tindak balas pemendakan bergantung kepada komposisi medium di mana ia berlaku (pH, kepekatan pelbagai garam). Untuk mengkalibrasi kaedah, kami menggunakan larutan akueus albumin manusia dengan penambahan 0.9% natrium klorida. Apabila kita mengukur kepekatan protein dalam air kencing, kita tidak tahu dan tidak mengambil kira sama ada pH air kencing atau komposisi garamnya. Kami juga tidak mengambil kira hakikat bahawa protein berlainan bertindak balas dengan berbeza dalam larutan asid sulfosalicylic. Ini menerangkan penyebaran besar hasil pengukuran yang ditunjukkan dalam Rajah. 3. Lebih dekat komposisi air kencing kepada komposisi penentukuran, lebih tepat hasil pengukuran. Walau bagaimanapun, terdapat sedikit sampel air kencing sedemikian. Dalam kebanyakan kes, komposisi air kencing adalah sedemikian rupa sehingga hasil pengukuran diremehkan dan sering agak ketara.

Yang terakhir disahkan oleh eksperimen yang dijelaskan di atas, di mana kepekatan protein diukur oleh kaedah sulfosalicylic dalam sampel air kencing yang tidak dicairkan dan dobel. Perbandingan data yang diperoleh menunjukkan bahawa pencairan air kencing (dengan mengambil kira tahap pencairan) membawa kepada peningkatan dalam pengukuran kepekatan protein sebanyak 15-33%. Fakta ini mengesahkan pengaruh ketara komposisi air kencing pada hasil penentuan kepekatan protein (kesan matriks).

Mengapa kaedah pyrogallol membolehkan untuk mendapatkan keputusan yang lebih tepat untuk mengukur kepekatan protein dalam air kencing? Pertama, disebabkan oleh kepelbagaian pencairan sampel air kencing dalam campuran reaksi. Jika dalam kaedah sulfosalicylic nisbah sampel / reagen urin adalah 1/3, maka dalam kaedah pyrogallol ia boleh berada dalam julat dari 1 / 12.5 hingga 1/60, bergantung kepada varian teknik, yang dengan ketara mengurangkan kesan komposisi air kencing pada hasil pengukuran. Kedua, reaksi berlaku dalam penampan succinate, iaitu, pada pH yang stabil. Dan akhirnya prinsip yang paling asas, jika boleh dikatakan, lebih telus. Sodium molybdate dan pyrogallol pewarna merah membentuk kompleks dengan molekul protein. Ini membawa kepada hakikat bahawa molekul pewarna di negeri ini bebas tidak menyerap cahaya pada panjang gelombang 600 nm, sebuah kompleks protein menyerap cahaya. Oleh itu, kita nampaknya menandakan setiap molekul protein dengan pewarna dan sebagai hasilnya kita dapati perubahan ketumpatan optik campuran tindak balas pada panjang gelombang 600 nm secara unik berkaitan dengan kepekatan protein dalam air kencing.

Sebagai kesimpulan, perbezaan yang paling ketara antara kaedah sulfosalicylic untuk menentukan protein dalam air kencing dan kaedah menggunakan pewarna merah pyrogallol dibentangkan dalam Jadual No. 1.

Tab. Tidak. 1. Ciri-ciri perbandingan dua kaedah untuk menentukan protein dalam air kencing (kaedah sulfosalicylic dan pyrogallol)

Penentuan protein air kencing dengan pyrogallol merah

Prinsip kaedah ini berdasarkan pengukuran fotometrik ketumpatan optik penyelesaian suatu kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan molekul kompleks pewarna merah pyrogallol dan natrium molybdate (kompleks Pyrogallol Red-Molybdate) dalam medium berasid. Keamatan warna penyelesaian adalah berkadar dengan kandungan protein dalam bahan di bawah kajian. Kehadiran detergen di dalam reagen memberikan takrifan yang setara dengan protein yang mempunyai sifat dan struktur yang berbeza.

Reagen. 1) 1.5 mmol / l larutan pyrogallol merah (PGA): 60 mg PGA dibubarkan dalam 100 ml metanol. Simpan pada suhu 0-5 ° C; 2) larutan penyangga 50 mmol / l succinate pH 2.5: 5.9 g asid succinic (HOOC - CH₂-SM₂-COOH); 0.14 g natrium oksalat (Na₂C₂O₄) dan 0.5 g natrium benzoat (C₆H₅COONa) dibubarkan dalam 900 ml air sulingan; 3) larutan 10 mmol / l crystallohydrate natrium molybdate (Na₂Moo₄ × 2H₂O): 240 mg natrium molibdat dibubarkan dalam 100 ml air suling; 4) Reagen bekerja: hingga 900 ml larutan penyangga succinate tambah 40 ml larutan PHC dan 4 ml larutan natrium molibdat. PH larutan diselaraskan kepada 2.5 dengan larutan 0.1 mol / l asid hidroklorik (HCl) dan isipadunya diselaraskan kepada 1 l. Reagen dalam bentuk ini sedia untuk digunakan dan stabil apabila disimpan di tempat yang gelap dan pada suhu 2-25 ° C selama 6 bulan; 5) larutan albumin standard 0.5 g / l.

Kursus penentuan. 0.05 ml air kencing yang dikaji dimasukkan ke dalam tiub ujian pertama, 0.05 ml larutan piawai albumin ditambah pada tiub ujian kedua dan 0.05 ml air suling ke tiub ujian ketiga (sampel kawalan), maka 3 ml reagen bekerja ditambah pada tiub ujian ini. Kandungan tiub bercampur-campur dan selepas 10 minit, sampel dan piawai akan difotasikan dari sampel kawalan pada panjang gelombang 596 nm dalam cuvette dengan panjang jalur optik 10 mm.

Pengiraan kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis mengikut formula:

di mana C adalah kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis, g / l; A_pr dan a_st- kepupusan sampel air kencing dan larutan albumin standard, g / l; 0.5 - kepekatan larutan albumin standard, g / l.

• warna penyelesaian (kompleks warna) stabil selama satu jam;
• hubungan berkadar secara langsung antara kepekatan protein dalam sampel dan penyerapan larutan bergantung kepada jenis fotometer;
• apabila kandungan protein dalam air kencing berada di atas 3 g / l, sampel dicairkan dengan larutan natrium klorida isotonik (9 g / l) dan penentuannya diulang. Tahap pencairan diambil kira apabila menentukan kepekatan protein.

Kami merawat hati

Rawatan, simptom, ubat

Pyrogallol penentuan protein merah dalam air kencing

02.26.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Biasanya, protein diekskresikan dalam air kencing dalam jumlah yang agak kecil, biasanya tidak melebihi 100-150 mg / hari.

Diuresis harian dalam orang yang sihat adalah 1000-1500 ml / hari; Oleh itu, kepekatan protein di bawah keadaan fisiologi adalah 8-10 mg / dL (0.08-0.1 g / l).

Jumlah protein air kencing diwakili oleh tiga pecahan utama - albumin, mucoprotein dan globulin.

Albumin urin adalah bahagian albumin serum yang telah ditapis dalam glomeruli dan tidak diserap semula di tubula buah pinggang; dalam penguraian normal albumin dalam air kencing adalah kurang daripada 30 mg / hari. Satu lagi sumber utama protein dalam air kencing ialah tubulus buah pinggang, terutamanya bahagian distal tubula. Tubul ini merembes dua pertiga daripada jumlah protein kencing; daripada jumlah ini, kira-kira 50% diwakili oleh glikoprotein Tamm-Horsfall, yang dirembeskan oleh epitel tubulus distal dan memainkan peranan penting dalam pembentukan batu kencing. Protein lain terdapat di dalam air kencing dalam jumlah yang kecil dan berasal dari protein plasma berat molekul rendah yang ditapis melalui penapis buah pinggang, yang tidak diserap semula di tubula buah pinggang, mikroglobulin dari epitelium tubula buah pinggang (RTE), serta pelepasan prostat dan vagina.

Proteinuria, iaitu, peningkatan dalam kandungan protein dalam air kencing adalah salah satu gejala yang paling penting, yang mencerminkan kerosakan buah pinggang. Walau bagaimanapun, beberapa keadaan lain juga boleh disertai proteinuria. Oleh itu, terdapat dua kumpulan utama proteinuria: proteinuria buah pinggang (benar) dan extrarenal (palsu).

Dalam proteinuria buah pinggang, protein memasuki air kencing terus dari darah kerana peningkatan kebolehtelapan penapis glomerular. Proteinuria renal sering dijumpai dalam glomerulonephritis, nefrosis, pyelonephritis, nephrosclerosis, amyloidosis buah pinggang, pelbagai bentuk nefropati, contohnya nefropati wanita hamil, demam, tekanan darah tinggi, dll. Proteinuria juga boleh didapati di kalangan orang yang sihat selepas melakukan senaman fizikal yang teruk, hipotermia, dan tekanan psikologi. Pada bayi yang baru lahir, proteinuria fisiologi diperhatikan pada minggu pertama kehidupan, dan apabila asthenia berlaku pada kanak-kanak dan remaja, proteinuria ortostatik (dalam kedudukan tegak badan) mungkin digabungkan dengan pertumbuhan pesat antara umur 7 hingga 18 tahun.

Dalam kes proteinuria palsu (extrarenal), sumber protein dalam air kencing adalah campuran leukosit, eritrosit, sel epitelium urothelia saluran kencing. Pereputan unsur-unsur ini, terutamanya yang dinyatakan dengan air kencing alkali, membawa kepada masuknya protein ke dalam air kencing, yang telah melewati penapis buah pinggang. Tahap utama proteinuria palsu memberikan darah dalam air kencing, dengan hematuria yang banyak, ia dapat mencapai 30 g / l dan lebih. Penyakit yang boleh disertai proteinuria extrarenal - urolithiasis, tuberkulosis buah pinggang, buah pinggang atau saluran kencing, sistitis, pyelitis, prostatitis, urethritis, vulvovaginitis.

Klasifikasi klinis termasuk proteinuria ringan (kurang dari 0.5 g / hari), Sedang (dari 0.5 hingga 4 g / hari), Atau teruk (lebih daripada 4 g / hari).

Kebanyakan pesakit dengan penyakit buah pinggang, seperti glomerulonephritis akut atau pyelonephritis, mendedahkan proteinuria sederhana, tetapi pesakit dengan sindrom nefrotik biasanya mengeluarkan lebih daripada 4 g protein dalam air kencing setiap hari.

Bagi penentuan kuantitatif protein, pelbagai jenis kaedah digunakan, khususnya kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov yang bersatu, kaedah biuret, kaedah asid sulfosalicylic, kaedah menggunakan pewarna biru Coomassie, pewarna merah pyrogallol, dan sebagainya.

Penggunaan pelbagai kaedah untuk menentukan protein dalam air kencing telah menyebabkan kekeliruan yang serius dalam tafsiran batasan kandungan protein dalam air kencing. Oleh kerana 2 kaedah yang paling biasa digunakan dalam makmal - dengan asid sulfosalicylic dan pewarna merah pyrogallol, kami menganggap masalah ketepatan batas-batas norma untuk mereka. Dari sudut pandangan kaedah sulfosalicylic dalam air kencing normal, kandungan protein tidak boleh melebihi 0.03 g / l, dan dari sudut pyrogallol, 0.1 g / l! Perbezaan tiga kali ganda.

Nilai rendah kepekatan normal protein dalam air kencing apabila menggunakan sulfosalicylic kerana perkara-perkara berikut:

• keluk penentukuran adalah berdasarkan larutan akueus albumin. Urin dalam komposinya sangat berbeza dengan air: pH, garam, sebatian berat molekul yang rendah (kreatinin, urea, dan sebagainya). Akibatnya, menurut Altshuler, Rakov dan Tkachev, kesilapan dalam menentukan protein air kencing boleh 3 kali atau lebih! Ya Keputusan yang betul dapat diperoleh hanya dalam kes di mana air kencing mempunyai graviti spesifik yang sangat rendah dan komposisinya dan pendekatan pH air;
• sensitiviti yang lebih tinggi daripada kaedah sulfosalicylic kepada albumin berbanding dengan protein lain (pada masa itu, seperti yang dinyatakan di atas, albumin dalam sampel air kencing normal tidak lebih daripada 30% daripada jumlah protein air kencing);
• jika pH urin dipindahkan ke sisi alkali, asid sulfosalicylic dinentralisasi, yang juga menyebabkan penurunan dalam penentuan protein;
• Kadar pemendapan precipitates tertakluk kepada variasi yang ketara - pada kepekatan protein yang rendah, pemendakan menjadi perlahan, dan penamatan awal tindak balas membawa kepada pengurangan hasil;
• kadar tindak balas pemendakan pada dasarnya bergantung pada pencampuran campuran reaksi. Pada kepekatan protein yang tinggi, gemetar dari tiub boleh membawa kepada pembentukan kepingan besar dan hujan pesatnya.

Semua ciri-ciri yang disenaraikan di dalam kaedah ini membawa kepada pengurangan yang signifikan terhadap kepekatan protein yang ditentukan dalam air kencing. Tahap yang kurang dilaporkan amat bergantung kepada komposisi sampel air kencing tertentu. Oleh kerana kaedah asid sulfosalicylic memberikan nilai yang kurang konsentrasi terhadap kepekatan protein, batasan biasa untuk kaedah ini adalah 0.03 g / l, kira-kira tiga kali terlalu rendah berbanding dengan data yang diberikan dalam buku rujukan asing mengenai diagnostik makmal klinikal.

Kebanyakan makmal di negara Barat telah meninggalkan penggunaan kaedah sulfosalicylic untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan secara aktif menggunakan kaedah pyrogallol untuk tujuan ini. Kaedah pyrogallol untuk menentukan kepekatan protein dalam air kencing dan cecair biologi lain adalah berdasarkan prinsip fotometrik untuk mengukur kepadatan optik kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan pewarna merah pyrogallol dan molekul kompleks molekul natrium molibdat (kompleks Pyrogallol Red - Molybdate).

Mengapa kaedah pyrogallol membolehkan untuk mendapatkan keputusan yang lebih tepat untuk mengukur kepekatan protein dalam air kencing? Pertama, disebabkan oleh kepelbagaian pencairan sampel air kencing dalam campuran reaksi. Jika dalam kaedah sulfosalicylic nisbah sampel / reagen urin adalah 1/3, maka dalam kaedah pyrogallol ia boleh berada dalam julat dari 1 / 12.5 hingga 1/60, bergantung kepada varian teknik, yang dengan ketara mengurangkan kesan komposisi air kencing pada hasil pengukuran. Kedua, reaksi berlaku dalam penampan succinate, iaitu, pada pH yang stabil. Dan, akhirnya, prinsip prinsip itu boleh dikatakan lebih "telus". Sodium molybdate dan pyrogallol pewarna merah membentuk kompleks dengan molekul protein. Ini membawa kepada fakta bahawa molekul pewarna dalam keadaan bebas yang tidak menyerap cahaya pada panjang gelombang 600 nm dalam kombinasi dengan protein menyerap cahaya. Oleh itu, kita seolah-olah menandakan setiap molekul protein dengan pewarna dan, sebagai hasilnya, kita melihat bahawa perubahan ketumpatan optik campuran tindak balas pada panjang gelombang 600 nm jelas berkorelasi dengan kepekatan protein dalam air kencing. Lebih-lebih lagi, kerana persamaan pyrogallol merah kepada pecahan protein yang berbeza hampir sama, kaedah ini membolehkan untuk menentukan jumlah protein air kencing. Oleh itu, had nilai normal kepekatan protein dalam air kencing adalah 0.1 g / l (ditunjukkan dalam semua garis panduan Barat moden untuk diagnostik klinikal dan makmal, termasuk Manual Klinikal Ujian Makmal, disunting oleh N. Tits). Ciri-ciri perbandingan kaedah pyrogallol dan sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ditunjukkan dalam Jadual 1.

Sebagai kesimpulan, saya ingin sekali lagi memberi tumpuan kepada fakta bahawa apabila makmal pergi dari kaedah sulfosalicylic untuk menentukan protein air kencing ke kaedah pyrogallol, had nilai normal meningkat dengan ketara (dari 0.03 g / l kepada 0.1 g / l!). Kakitangan makmal ini sememangnya perlu memberitahu doktor, kerana Dalam keadaan ini, diagnosis proteinuria hanya boleh dibuat dalam kes apabila kandungan protein dalam air kencing melebihi 0.1 g / l.

3. Penentuan protein.

Prinsip kaedah ini berdasarkan pembekuan protein dalam air kencing dengan kehadiran asid nitrik (atau larutan 20% sulfosalicylic).

Kemajuan kerja: hingga 5 titis air kencing tambah 1-2 titis asid nitrik (atau sulfosalicylic). Di hadapan protein dalam air kencing muncul kekeruhan.

Jadual Pengesanan komponen patologi air kencing.

Nota: di hadapan glukosa dan protein dalam air kencing yang diperiksa, kandungan kuantitatif mereka ditentukan.

Penentuan kuantitatif protein dalam air kencing dengan kaedah colorimetric dengan pyrogallol merah.

Prinsip kaedah ini: Apabila protein berinteraksi dengan pyrogallol merah dan natrium molybdate, kompleks berwarna dibentuk, keamatan warna, yang berkadaran dengan kepekatan protein dalam sampel.

Reagen: Reagen bekerja - larutan merah pyrogallol dalam penyangga succinate, penyelesaian protein penentukuran dengan kepekatan 0.50 g / l

Campurkan sampel, tahan selama 10 minit. pada suhu bilik (18-25 ° C). Ukur ketumpatan optik yang dialami (D_op) dan sampel penentukuran (D_kepada) terhadap sampel kawalan pada λ = 598 (578-610) nm. Pewarna stabil selama 1 jam.

Pengiraan: kepekatan protein dalam air kencing (C) g / l dikira dengan formula:

Nilai biasa: sehingga 0.094 g / l, (0.141 g / hari)

Penentuan kuantitatif glukosa dalam air kencing dengan kaedah glukosa oksidase.

Prinsip kaedah ini: Apabila D-glukosa dioksidakan oleh oksigen atmosfera di bawah tindakan oksidase glukosa, jumlah equimolar hidrogen peroksida terbentuk. Di bawah tindakan peroksidase, hidrogen peroksida mengoksidakan substrat kromogenik (campuran fenol dan 4 aminoantipirin - 4AG) dengan pembentukan produk berwarna. Keamatan warna adalah berkadar dengan kandungan glukosa.

2 N₂Oh₂ + phenol + 4AH sebatian berwarna + 4N₂Oh

Kemajuan kerja: 1 ml penyelesaian kerja dan 0.5 ml buffer fosfat dimasukkan ke dalam dua tiub. 0.02 ml air kencing ditambah ke tiub pertama, dan 0.02 ml calibrator ditambah kepada kedua (penentukuran, penyelesaian standard glukosa, 10 mmol / l). Sampel bercampur, diinkubasi selama 15 minit pada suhu 37 ° C dalam termostat, dan kepadatan optik diukur oleh eksperimen (D_op) dan penentukuran (D_kepada) sampel terhadap reagen bekerja pada panjang gelombang 500-546 nm.

Kandungan glukosa dalam air kencing setiap hari ditentukan oleh mmol / hari dengan mendarabkan hasil yang diperolehi oleh jumlah air kencing yang dikumpulkan setiap hari.

Nota Apabila kandungan gula dalam air kencing lebih daripada 1% mesti dicairkan.

Pada masa ini, makmal biokimia menggunakan kaedah bersatu untuk menganalisis urin untuk glukosa menggunakan ujian glukosa ujian glukosa reaktif atau menggunakan jalur ujian gabungan untuk pH, protein, glukosa, badan keton dan darah. Jalur ujian, direndam di dalam sebuah kapal dengan air kencing selama 1 saat. dan bandingkan warna pada skala.

Doktor Hepatitis

rawatan hati

Protein biasa dalam kaedah pyrogallol air kencing

Orang yang sihat menghasilkan 1.0-1.5 liter air kencing setiap hari. Kandungan 8-10 mg / dl protein di dalamnya adalah fenomena fisiologi. Pengambilan protein setiap hari dalam air kencing 100-150 mg tidak boleh menyebabkan kecurigaan. Globulin, mucoprotein dan albumin adalah apa yang membentuk jumlah protein dalam air kencing. Aliran keluar albumin yang besar menunjukkan pelanggaran proses penapisan di buah pinggang dan dipanggil proteinuria atau albuminuria.

Setiap bahan dalam air kencing diberi kadar "sihat", dan jika indeks protein berubah, ini mungkin menunjukkan patologi buah pinggang.

Urinalisis melibatkan penggunaan sama ada bahagian pertama (pagi), atau mengambil sampel harian. Yang terakhir adalah lebih baik untuk menilai tahap proteinuria, kerana kandungan protein telah diucapkan turun naik harian. Urin pada siang hari dikumpulkan dalam satu bekas, mengukur jumlah jumlah. Untuk makmal yang menjalankan analisis protein air kencing, satu sampel standard (dari 50 hingga 100 ml) dari bekas ini adalah mencukupi; jumlah baki tidak diperlukan. Untuk maklumat lanjut, ujian tambahan dilakukan pada Zimnitsky, yang menunjukkan sama ada penunjuk air kencing setiap hari adalah normal.

Kembali ke jadual kandungan

Protein dalam air kencing adalah normal pada orang dewasa tidak boleh melebihi 0.033 g / l. Pada masa yang sama kadar harian tidak lebih tinggi daripada 0.05 g / l. Bagi wanita hamil, kadar protein dalam air kencing setiap hari adalah lebih tinggi - 0.3 g / l., Dan pada waktu pagi air kencing adalah sama - 0.033 g / l. Standard protein berbeza dalam analisis umum air kencing dan kanak-kanak: 0.036 g / l untuk bahagian pagi dan 0.06 g / l sehari. Selalunya, makmal menjalankan analisis menggunakan dua kaedah, yang menunjukkan berapa banyak pecahan protein terkandung di dalam air kencing. Nilai normal di atas sah untuk analisis yang dijalankan dengan asid sulfosalicylic. Sekiranya pewarna merah pyrogallol digunakan, nilai-nilai itu akan berbeza tiga kali.

Kembali ke jadual kandungan

Penyebab protein dalam air kencing boleh menjadi proses patologi di buah pinggang:

• penapisan di glomeruli buah pinggang pergi dengan cara yang salah;
• penyerapan dalam tubulus protein terjejas;
• Sesetengah penyakit mempunyai beban yang kuat di buah pinggang - apabila protein dalam darah meningkat, buah pinggang hanya tidak mempunyai masa untuk menyaringnya.

Sebab yang selebihnya dianggap sebagai bukan buah pinggang. Ini adalah bagaimana perkembangan albuminuria berfungsi. Protein dalam analisis air kencing muncul dalam tindak balas alergi, epilepsi, kegagalan jantung, leukemia, keracunan, myeloma, kemoterapi, penyakit sistemik. Selalunya, penunjuk ini dalam analisis pesakit akan menjadi loceng hipertensi pertama.

Peningkatan protein air kencing mungkin disebabkan oleh faktor-faktor yang tidak bersifat patologi, jadi analisis tambahan diperlukan. Kembali kepada jadual kandungan

Kaedah kuantitatif untuk menentukan protein dalam air kencing memberi kesilapan, oleh itu, adalah disyorkan untuk menjalankan beberapa analisis, dan kemudian gunakan formula untuk mengira nilai yang betul. Kandungan protein air kencing diukur dalam g / l atau mg / l. Petunjuk protein ini memungkinkan untuk menentukan tahap proteinuria, mencadangkan sebab, menilai prognosis dan menentukan strategi.

Kembali ke jadual kandungan

Untuk fungsi penuh badan memerlukan pertukaran berterusan antara darah dan tisu. Ia hanya mungkin jika ada tekanan osmotik tertentu di dalam saluran darah. Protein plasma darah hanya mengekalkan tahap tekanan sedemikian, apabila bahan molekul rendah mudah lulus dari medium dengan kepekatan yang tinggi ke medium dengan kepekatan yang lebih rendah. Kehilangan molekul protein menyebabkan pembebasan darah dari ranjangnya ke tisu, yang penuh dengan edema yang kuat. Ini adalah manifestasi proteinuria sederhana dan teruk.

Tahap awal albuminuria adalah asimtomatik. Pesakit memberi perhatian hanya kepada manifestasi penyakit yang mendasari, yang merupakan penyebab protein dalam air kencing.

Jejak proteinuria dipanggil peningkatan tahap protein dalam air kencing kerana penggunaan produk tertentu. Kembali ke jadual kandungan

Urin untuk analisis dikumpulkan dalam bekas bersih dan skim. Sebelum mengumpul tandas ditunjukkan perineum, anda perlu mencuci dengan sabun dan air. Wanita dinasihatkan untuk menutup vagina dengan sekeping kapas atau tampon supaya pelepasan vagina tidak menjejaskan hasilnya. Pada malam itu, lebih baik tidak minum alkohol, air mineral, kopi, pedas, asin, dan makanan yang memberikan air kencing warna (blueberry, bit). Penuaan fizikal yang kuat, berjalan kaki yang panjang, tekanan, demam dan berpeluh, penggunaan berlebihan makanan protein atau ubat sebelum memberikan air kencing menimbulkan kemunculan protein dalam analisis air kencing seseorang yang sihat. Fenomena yang dibenarkan ini dipanggil proteinuria jejak.

Kembali ke jadual kandungan

Penyakit buah pinggang yang membawa kepada kehilangan protein:

• Amyloidosis. Sel-sel normal di buah pinggang digantikan oleh amyloid (kompleks protein-saccharide), yang menghalang tubuh daripada bekerja secara normal. Di peringkat proteinurik, amiloid disimpan di dalam tisu ginjal, memusnahkan nefron dan, akibatnya, penapis buah pinggang. Jadi protein mendapat dari darah ke dalam air kencing. Tahap ini boleh bertahan lebih dari 10 tahun.
• Nefropati diabetes. Oleh kerana metabolisme karbohidrat dan lipid yang tidak betul, saluran darah, glomeruli dan tubulus di buah pinggang dimusnahkan. Protein dalam air kencing adalah tanda pertama komplikasi diabetes.
• Penyakit genesis keradangan - nefritis. Selalunya, luka-luka ini menjejaskan saluran darah, glomeruli dan sistem pyelocaliceal, mengganggu perjalanan biasa sistem penapisan.
• Glomerulonephritis dalam kebanyakan kes adalah sifat autoimun. Pesakit mengadu tentang penurunan jumlah air kencing, sakit belakang dan peningkatan tekanan. Untuk rawatan glomerulonephritis mengesyorkan diet, rejimen dan terapi ubat.
• Pyelonephritis. Dalam tempoh akut berlaku dengan gejala jangkitan bakteria: menggigil, mual, sakit kepala. Ini adalah penyakit berjangkit.
• Penyakit ginjal polikistik.

Dalam tubuh yang sihat, molekul protein (dan saiznya agak besar) tidak boleh melalui sistem penapisan buah pinggang. Oleh itu, protein dalam air kencing tidak seharusnya. Penunjuk ini adalah sama untuk lelaki dan wanita. Sekiranya analisis menunjukkan proteinuria, adalah penting untuk berunding dengan doktor atas alasan. Pakar akan menganggarkan berapa banyak tahap protein dinaikkan, sama ada terdapat patologi bersamaan, bagaimana untuk memulihkan fungsi normal badan. Menurut statistik, wanita mempunyai risiko penyakit urogenital yang lebih tinggi daripada lelaki.

Prinsip kaedah ini berdasarkan pembekuan protein dalam air kencing dengan kehadiran asid nitrik (atau larutan 20% sulfosalicylic).

Kemajuan kerja: hingga 5 titis air kencing tambah 1-2 titis asid nitrik (atau sulfosalicylic). Di hadapan protein dalam air kencing muncul kekeruhan.

Jadual Pengesanan komponen patologi air kencing.

Nota: di hadapan glukosa dan protein dalam air kencing yang diperiksa, kandungan kuantitatif mereka ditentukan.

Prinsip kaedah ini: Apabila protein berinteraksi dengan pyrogallol merah dan natrium molybdate, kompleks berwarna dibentuk, keamatan warna, yang berkadaran dengan kepekatan protein dalam sampel.

Reagen: Reagen bekerja - larutan merah pyrogallol dalam penyangga succinate, penyelesaian protein penentukuran dengan kepekatan 0.50 g / l

Campurkan sampel, tahan selama 10 minit. pada suhu bilik (18-25 ° C). Ukur kepadatan optik sampel (Dop) dan sampel penentukuran (Dk) terhadap sampel kawalan pada λ = 598 (578-610) nm. Pewarna stabil selama 1 jam.

Pengiraan: kepekatan protein dalam air kencing (C) g / l dikira dengan formula:

di mana: Dop = Dk = C = g / l.

Nilai biasa: sehingga 0.094 g / l, (0.141 g / hari)

Prinsip kaedah ini: Apabila D-glukosa dioksidakan oleh oksigen atmosfera di bawah tindakan oksidase glukosa, jumlah equimolar hidrogen peroksida terbentuk. Di bawah tindakan peroksidase, hidrogen peroksida mengoksidakan substrat kromogenik (campuran fenol dan 4 aminoantipirin - 4AG) dengan pembentukan produk berwarna. Keamatan warna adalah berkadar dengan kandungan glukosa.

Glukosa + O2 + H2O gluconolactone + H2O2

2H2O2 + phenol + 4AAP sebatian berwarna + 4H2O

Kemajuan kerja: 1 ml penyelesaian kerja dan 0.5 ml buffer fosfat dimasukkan ke dalam dua tiub. 0.02 ml air kencing ditambah ke tiub pertama, dan 0.02 ml calibrator ditambah kepada kedua (penentukuran, penyelesaian standard glukosa, 10 mmol / l). Sampel bercampur, diinkubasi selama 15 minit pada suhu 37 ° C dalam termostat, dan ketumpatan optik sampel percubaan (Dop) dan penentukuran (Dk) terhadap reagen kerja diukur pada panjang gelombang 500-546 nm.

Pengiraan: C = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

Kandungan glukosa dalam air kencing setiap hari ditentukan oleh mmol / hari dengan mendarabkan hasil yang diperolehi oleh jumlah air kencing yang dikumpulkan setiap hari.

Nota Apabila kandungan gula dalam air kencing lebih daripada 1% mesti dicairkan.

Pada masa ini, makmal biokimia menggunakan kaedah bersatu untuk menganalisis urin untuk glukosa menggunakan ujian glukosa ujian glukosa reaktif atau menggunakan jalur ujian gabungan untuk pH, protein, glukosa, badan keton dan darah. Jalur ujian, direndam di dalam sebuah kapal dengan air kencing selama 1 saat. dan bandingkan warna pada skala.

Penentuan protein menggunakan penunjuk merah pyrogallol

Prinsip kaedah ini berdasarkan pengukuran fotometrik ketumpatan optik penyelesaian suatu kompleks berwarna yang terbentuk oleh interaksi molekul protein dengan molekul kompleks pewarna merah pyrogallol dan natrium molybdate (kompleks Pyrogallol Red-Molybdate) dalam medium berasid. Keamatan warna penyelesaian adalah berkadar dengan kandungan protein dalam bahan di bawah kajian. Kehadiran detergen di dalam reagen memberikan takrifan yang setara dengan protein yang mempunyai sifat dan struktur yang berbeza.

Reagen. 1) 1.5 mmol / l larutan pyrogallol merah (PGA): 60 mg PGA dibubarkan dalam 100 ml metanol. Simpan pada suhu 0-5 ° C; 2) larutan penyangga 50 mmol / l succinate pH 2.5: 5.9 g asid succinic (HOOC - CH2 - CH2 - COOH); 0.14 g natrium oksalat (Na2C2O4) dan 0.5 g natrium benzoat (C6H5COONa) dibubarkan dalam 900 ml air suling; 3) larutan hidrat kristal natrium molybdate 10 mmol / l (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg natrium molybdate dibubarkan dalam 100 ml air suling; 4) Reagen bekerja: hingga 900 ml larutan penyangga succinate tambah 40 ml larutan PHC dan 4 ml larutan natrium molibdat. PH larutan diselaraskan kepada 2.5 dengan larutan 0.1 mol / l asid hidroklorik (HCl) dan isipadunya diselaraskan kepada 1 l. Reagen dalam bentuk ini sedia untuk digunakan dan stabil apabila disimpan di tempat yang gelap dan pada suhu 2-25 ° C selama 6 bulan; 5) larutan albumin standard 0.5 g / l.

Kursus penentuan. 0.05 ml air kencing yang dikaji dimasukkan ke dalam tiub ujian pertama, 0.05 ml larutan piawai albumin ditambah pada tiub ujian kedua dan 0.05 ml air suling ke tiub ujian ketiga (sampel kawalan), maka 3 ml reagen bekerja ditambah pada tiub ujian ini. Kandungan tiub bercampur-campur dan selepas 10 minit, sampel dan piawai akan difotasikan dari sampel kawalan pada panjang gelombang 596 nm dalam cuvette dengan panjang jalur optik 10 mm.

Pengiraan kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis mengikut formula:

C = 0.5 × Apr / Ast,

di mana C adalah kepekatan protein dalam sampel air kencing dianalisis, g / l; Apr dan Ast - kepupusan sampel air kencing dan larutan albumin standard, g / l; 0.5 - kepekatan larutan albumin standard, g / l.

• warna penyelesaian (kompleks warna) stabil selama satu jam;
• hubungan berkadar secara langsung antara kepekatan protein dalam sampel dan penyerapan larutan bergantung kepada jenis fotometer;
• apabila kandungan protein dalam air kencing berada di atas 3 g / l, sampel dicairkan dengan larutan natrium klorida isotonik (9 g / l) dan penentuannya diulang. Tahap pencairan diambil kira apabila menentukan kepekatan protein.

• Penentuan protein air kencing
• Percubaan Asid Sulfosalicylic Bersepadu
• The Unified Brandberg - Roberts - Stolnikov Method
• Menentukan jumlah protein dalam air kencing dengan tindak balas dengan asid sulfosalicylic
• Kaedah Biuret
• Pengesanan dalam air kencing protein Bens - Jones

Proteinuria adalah fenomena di mana protein dikesan dalam air kencing, yang menunjukkan kemungkinan kerosakan buah pinggang, berfungsi sebagai faktor dalam perkembangan penyakit jantung, saluran darah, saluran limfa.

Pengesanan protein dalam air kencing tidak selalu menunjukkan penyakit. Fenomena yang sama adalah tipikal walaupun untuk orang yang benar-benar sihat, di mana protein air kencing dapat dikesan. Hypothermia, usaha fizikal, penggunaan makanan protein membawa kepada kemunculan protein dalam air kencing, yang hilang tanpa sebarang rawatan.

Pada masa pemeriksaan, 17% orang yang sihat menentukan protein, tetapi hanya 2% daripada jumlah orang ini menunjukkan hasil ujian positif sebagai tanda penyakit buah pinggang.

Molekul protein tidak boleh masuk ke dalam darah. Mereka adalah penting untuk badan - ia adalah bahan binaan untuk sel, mengambil bahagian dalam reaksi sebagai koenzim, hormon, antibodi. Dalam kedua-dua lelaki dan wanita, kadar adalah ketiadaan lengkap protein dalam air kencing.

Fungsi pencegahan kehilangan molekul protein oleh tubuh dilakukan oleh buah pinggang.

Dua sistem ginjal terlibat dalam menapis air kencing:

1. glomeruli - jangan biarkan dalam molekul besar, tetapi jangan memegang albumin, globulin - sebahagian kecil daripada molekul protein;
2. tubulus buah pinggang - menyerap protein glomeruli ditapis, kembali ke sistem peredaran darah.

Albumin (kira-kira 49%), mucoprotein, globulin didapati dalam air kencing, di mana bahagian imunoglobulin menyumbang kira-kira 20%.

Globulin - protein whey dalam berat molekul tinggi, yang dihasilkan dalam sistem imun dan hati. Kebanyakannya disintesis oleh sistem imun, merujuk kepada immunoglobulin atau antibodi.

Albumin adalah sebahagian kecil daripada protein yang mula-mula muncul dalam air kencing walaupun dengan kerosakan ginjal kecil. Terdapat jumlah albumin tertentu dalam air kencing yang sihat, tetapi ia tidak begitu penting yang tidak dapat dikesan menggunakan diagnostik makmal.

Ambang yang lebih rendah yang boleh dikesan menggunakan diagnostik makmal adalah 0.033 g / l. Jika lebih daripada 150 mg protein hilang setiap hari, mereka bercakap tentang proteinuria.

Data protein air kencing asas

Penyakit dengan proteinuria ringan adalah asimtomatik. Secara visual, air kencing tanpa protein tidak boleh dibezakan daripada air kencing, di mana terdapat sedikit protein. Air kencing yang berminyak menjadi sudah mempunyai proteinuria yang tinggi.

Adalah mungkin untuk menganggap zat protein aktif dalam air kencing oleh penampilan pesakit hanya dengan tahap sederhana atau teruk penyakit akibat penampilan edema pada kaki, muka, perut.

Pada peringkat awal penyakit, berikut mungkin tanda-tanda proteinuria tidak langsung:

• perubahan warna air kencing;
• peningkatan kelemahan;
• kekurangan selera makan;
• mual, muntah;
• sakit tulang;
• mengantuk, pening;
• suhu tinggi.

Kemunculan tanda-tanda seperti itu tidak boleh diabaikan, terutamanya semasa kehamilan. Ini mungkin bermaksud sedikit penyelewengan dari norma, dan mungkin merupakan gejala untuk mengembangkan preeklampsia, preeklampsia.

Mengira kehilangan protein bukanlah tugas yang mudah, untuk mencapai gambaran yang lebih lengkap tentang keadaan pesakit, beberapa ujian makmal digunakan.

Kesukaran memilih kaedah untuk mengesan protein berlebihan dalam air kencing dijelaskan oleh:

• kepekatan protein rendah, di mana pengiktirafan memerlukan instrumen ketepatan tinggi;
• komposisi air kencing, merumitkan tugas, kerana ia mengandungi bahan yang memutarbelitkan hasilnya.

Maklumat yang paling besar disediakan oleh analisis bahagian pertama air kencing, yang dikumpulkan selepas terbangun.

Pada malam sebelum analisis, syarat berikut mesti dipenuhi:

• Jangan makan pedas, goreng, makanan protein, alkohol;
• tidak termasuk diuretik selama 48 jam;
• had aktiviti fizikal;
• hati-hati ikut peraturan kebersihan diri.

Air kencing pagi adalah yang paling bermaklumat, kerana ia adalah jangka panjang dalam pundi kencing, kurang bergantung kepada pengambilan makanan.

Jumlah protein dalam air kencing boleh dianalisis dengan bahagian rawak, yang diambil pada bila-bila masa, tetapi analisis ini kurang bermaklumat, semakin tinggi kemungkinan kebarangkalian.

Untuk mengukur kehilangan protein setiap hari, analisis jumlah urin harian dilakukan. Untuk melakukan ini, dalam masa 24 jam dikumpulkan dalam bekas plastik khas semua air kencing diperuntukkan untuk hari itu. Anda boleh mula mengutip pada bila-bila masa. Keadaan utama - tepat hari pengumpulan.

Takrif kualitatif proteinuria adalah berdasarkan penentuan protein oleh faktor fizikal atau kimia. Kaedah kualitatif berkaitan dengan pemeriksaan, yang membolehkan untuk mewujudkan kehadiran protein dalam air kencing, tetapi tidak memberi peluang untuk menilai tahap proteinuria secara tepat.

Contoh yang digunakan:

• dengan mendidih;
• asid sulfosalicylic;
• asid nitrik, larutan larionik pada sampel cincin Heller.

Sampel dengan asid sulfosalicylic dilakukan dengan membandingkan sampel air kencing dengan yang berpengalaman, di mana 7-8 tetes 20% asid sulfosalicylic ditambah ke dalam air kencing. Kesimpulan tentang kehadiran protein dibuat menurut keamatan kekeruhan yang berlebihan yang muncul di dalam tiub ujian semasa tindak balas.

Ujian Geller lebih biasa menggunakan 50% asid nitrik. Kepekaan kaedah ini ialah 0.033 g / l. Dengan kepekatan protein seperti dalam tiub ujian dengan sampel air kencing dan reagen selama 2-3 minit selepas permulaan percubaan, cincin benang putih muncul, pembentukannya menunjukkan kehadiran protein.

Kaedah kuantitatif termasuk:

• kaedah untuk menentukan protein dalam ujian air kencing;
• Kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov.

Kaedah penentuan mengikut kaedah Brandberg-Roberts-Stolnikov didasarkan pada kaedah cincin Geller, tetapi membolehkan seseorang untuk lebih tepat menganggarkan jumlah protein. Semasa melakukan ujian menggunakan teknik ini, beberapa cecair urin mencapai rupa cincin protein seperti benang pada selang masa antara 2-3 minit dari awal ujian.

Dalam amalan, kaedah ujian jalur digunakan dengan pewarna biru bromophenol yang digunakan sebagai penunjuk. Kelemahan jalur ujian adalah kepekaan terpilih terhadap albumin, yang menyebabkan gangguan pada hasil peningkatan kes kepekatan globin atau protein lain.

Kekurangan kaedah juga sensitiviti yang agak rendah terhadap ujian terhadap protein. Jalur ujian mula bertindak balas terhadap kehadiran protein dalam air kencing pada kepekatan protein lebih besar daripada 0.15 g / l.

Kaedah penilaian kuantitatif boleh dibahagikan kepada:

Kaedah adalah berdasarkan sifat protein untuk mengurangkan kelarutan di bawah tindakan agen yang mengikat dengan pembentukan sebatian yang tidak larut.

Ejen yang menyebabkan protein mengikat, boleh:

• asid sulfosalicylic;
• asid trichloroacetic;
• benzethonium chloride.

Pada keputusan ujian, kesimpulan dibuat berdasarkan tahap pengecilan fluks cahaya dalam sampel dengan penggantungan berbanding dengan satu kawalan. Hasil dari kaedah ini tidak boleh selalu dikaitkan dengan dipercayai kerana perbezaan dalam keadaan: kecepatan pencampuran reaktan, suhu, keasaman medium.

Kesan ke atas penilaian pengambilan ubat hari sebelum, sebelum menjalankan ujian menggunakan kaedah ini, tidak boleh diambil:

• antibiotik;
• sulfonamides;
• ubat yang mengandungi yodium.

Kaedah merujuk kepada kos yang tersedia, yang membolehkan ia digunakan secara meluas untuk pemeriksaan. Tetapi hasil yang lebih tepat boleh didapati dengan menggunakan teknik warna lebih mahal.

Kaedah sensitif yang tepat menentukan kepekatan protein dalam air kencing termasuk kaedah warna.

Anda boleh melakukannya dengan ketepatan yang tinggi:

• reaksi biuret;
• teknik Lowry;
• Teknik pewarnaan yang menggunakan pewarna yang membentuk kompleks dengan protein air kencing yang berbeza daripada sampel secara visual.

Kaedah colorimetric untuk mengesan protein dalam air kencing

Kaedah merujuk kepada yang dipercayai, sangat sensitif, membolehkan untuk menentukan dalam albumin urin, globulin, paraprotein. Ia digunakan sebagai kaedah utama untuk menjelaskan keputusan ujian kontroversial, serta protein air kencing harian pada pesakit dengan jabatan-jabatan nefrological hospitals.

Hasil yang lebih tepat dapat dicapai oleh kaedah Lowry, yang berdasarkan reaksi biuret, serta tindak balas Folin, yang mengiktiraf tryptophan dan tirosin dalam molekul protein.

Untuk menghapus kesilapan yang mungkin, sampel air kencing dimurnikan oleh dialisis daripada asid amino, asid urik. Kesilapan boleh dilakukan apabila menggunakan salicylates, tetracyclines, chlorpromazine.

Kaedah yang paling tepat untuk menentukan protein adalah berdasarkan kepada harta untuk mengikat kepada pewarna yang digunakan:

• ponceau;
• Coomassie biru yang cemerlang;
• merah pyrogallic.

Pada siang hari, jumlah protein yang dikumuhkan di dalam air kencing berbeza-beza. Untuk lebih objektif menilai kehilangan protein dalam air kencing, memperkenalkan konsep protein harian dalam air kencing. Nilai ini diukur dalam g / hari.

Untuk penilaian cepat protein harian dalam air kencing, jumlah protein dan kreatinin ditentukan dalam satu bahagian air kencing, maka nisbah protein / kreatinin diambil dari kehilangan protein setiap hari mengikut nisbah.

Kaedah ini berdasarkan fakta bahawa kadar kencing kreatinin kencing adalah tetap, tidak berubah pada siang hari. Dalam orang yang sihat, nisbah normal protein: kreatinin dalam air kencing adalah 0.2.

Kaedah ini menghapuskan kemungkinan kesalahan yang mungkin berlaku apabila mengumpul air kencing setiap hari.

Ujian kualitatif lebih kerap daripada ujian kuantitatif memberikan hasil negatif palsu atau palsu. Kesilapan timbul berkaitan dengan ubat, tabiat pemakanan, aktiviti fizikal pada malam sebelum analisis.

Penyahkodan ujian kualitatif ini diberikan oleh penilaian visual kekeruhan dalam tiub ujian berbanding dengan hasil ujian dengan kawalan:

1. reaksi positif yang lemah dianggarkan sebagai +;
2. positif ++;
3. sangat positif +++.

Uji cincin Geller lebih tepat menilai kehadiran protein dalam air kencing, tetapi tidak membenarkan mengukur protein dalam air kencing. Seperti dengan ujian asid sulfosalicylic, ujian Geller hanya memberi gambaran mengenai kandungan protein air kencing.

Kaedah ini membolehkan untuk menilai tahap proteinuria secara kuantitatif, tetapi terlalu memakan masa, tidak tepat, kerana dengan pencairan yang kuat ketepatan penilaian menurun.

Untuk mengira protein, anda perlu mengalikan tahap pencairan air kencing dengan 0, 033 g / l:

Ujian tidak memerlukan syarat khas, prosedur ini mudah dilakukan di rumah. Untuk melakukan ini, anda perlu menurunkan jalur ujian ke dalam air kencing selama 2 minit.

Hasilnya akan dinyatakan dengan jumlah tambah pada jalur, pengekodan yang terkandung di dalam jadual:

1. Hasil ujian yang bersamaan dengan nilai sehingga 30 mg / 100 ml sesuai dengan proteinuria fisiologi.
2. Nilai pada jalur ujian 1+ dan 2 ++ bermakna proteinuria yang ketara.
3. Nilai 3 +++, 4 ++++ ditandai dengan proteinuria patologi yang disebabkan oleh penyakit buah pinggang.

Jalur ujian hanya boleh menentukan kadar peningkatan protein dalam air kencing. Mereka tidak digunakan untuk diagnostik yang tepat, dan lebih-lebih lagi mereka tidak boleh mengatakan apa maksudnya.

Jangan biarkan jalur ujian mencukupi untuk menilai jumlah protein dalam air kencing pada wanita hamil. Kaedah penilaian yang lebih dipercayai ialah penentuan protein dalam air kencing setiap hari.

Penentuan protein air kencing menggunakan jalur ujian:

Protein harian dalam air kencing adalah diagnosis yang lebih tepat mengenai penilaian keadaan berfungsi buah pinggang. Untuk ini anda perlu mengumpul semua air kencing yang dikumuhkan oleh buah pinggang setiap hari.

Kandungan protein dalam air kencing boleh didapati dengan nisbah protein: kreatinin, data ditunjukkan dalam jadual:

Nilai yang sah untuk nisbah protein / kreatinin ialah data dalam jadual:

Dengan kehilangan lebih daripada 3.5 g protein setiap hari, keadaan ini dipanggil proteinuria besar-besaran.

Sekiranya terdapat banyak protein dalam air kencing, pemeriksaan semula diperlukan selepas 1 bulan, kemudian selepas 3 bulan, mengikut keputusan, yang menentukan mengapa norma melebihi.

Sebab-sebab peningkatan protein dalam air kencing adalah peningkatan pengeluaran dalam badan dan pelanggaran buah pinggang, membezakan proteinuria:

• fisiologi - penyelewengan kecil dari norma disebabkan oleh proses fisiologi, diselesaikan secara spontan;
• patologi - perubahan disebabkan akibat proses patologi di buah pinggang atau organ lain badan, tanpa rawatan berlanjutan.

Peningkatan sedikit protein dapat dilihat dengan pemakanan protein yang berlimpah, luka bakar mekanikal, kecederaan, disertai dengan peningkatan pengeluaran imunoglobulin.

A proteinuria ringan mungkin disebabkan oleh senaman fizikal, tekanan psiko-emosi, atau mengambil ubat-ubatan tertentu.

Proteinuria fisiologi adalah peningkatan dalam protein air kencing pada kanak-kanak pada hari pertama selepas kelahiran. Tetapi selepas seminggu hidup, kandungan protein dalam air kencing seorang kanak-kanak dianggap sebagai penyimpangan dari norma dan menunjukkan patologi yang berkembang.

Penyakit buah pinggang, penyakit berjangkit juga kadang-kadang disertai dengan penampilan protein dalam air kencing.

Keadaan seperti biasanya sesuai dengan kadar proteinuria yang rendah, adalah fenomena sementara, dengan cepat menyebarkan diri mereka sendiri, tanpa memerlukan rawatan khusus.

Keadaan yang lebih teruk, proteinuria teruk dicatat dalam kes:

• glomerulonephritis;
• diabetes;
• penyakit jantung;
• kanser pundi kencing;
• pelbagai myeloma;
• jangkitan, kerosakan dadah, penyakit ginjal polikistik;
• tekanan darah tinggi;
• sistemik lupus erythematosus;
• Sindrom Goodpasture.

Halangan usus, kegagalan jantung, dan hipertiroidisme boleh menyebabkan jejak protein dalam air kencing.

Varieti proteinuria dikelaskan dalam beberapa cara. Untuk penilaian kualitatif protein, seseorang boleh menggunakan klasifikasi Yaroshevsky.

Menurut sistematik Yaroshevsky, yang dicipta pada tahun 1971, proteinuria dibezakan:

1. buah pinggang - termasuk pencabulan penapisan glomerular, pelepasan protein tubula, kekurangan reagen penjerapan protein di tubula;
2. prerenal - berlaku di luar buah pinggang, perkumuhan hemoglobin, protein yang berlebihan dalam darah akibat pelbagai myeloma;
3. Postrenal - berlaku di tapak saluran kencing selepas buah pinggang, perkumuhan protein dalam kemusnahan organ-organ kencing.

Untuk penilaian kuantitatif mengenai apa yang berlaku, derajat proteinuria yang bersyarat dipisahkan. Perlu diingati bahawa mereka boleh dengan mudah melangkah lebih berat tanpa rawatan.

Tahap proteinuria yang paling teruk berkembang dengan kehilangan lebih daripada 3 g protein setiap hari. Kehilangan protein dari 30 mg hingga 300 mg sehari sesuai dengan tahap sederhana atau mikroalbumuria. Sehingga 30 mg protein dalam air kencing setiap hari bermakna proteinuria ringan.

Protein norma dalam air kencing berapa banyak?

Protein normal dalam air kencing tidak praktikal (kurang daripada 0.002 g / l). Walau bagaimanapun, dalam beberapa keadaan, sedikit protein boleh muncul di dalam air kencing pada individu yang sihat selepas menelan sejumlah besar makanan protein, akibat penyejukan, dengan tekanan emosional, tenaga fizikal yang berpanjangan (proteinuria marching yang dipanggil).

Kemunculan sejumlah besar protein dalam air kencing (proteinuria) adalah patologi. Penyebab proteinuria boleh menjadi penyakit buah pinggang (glomerulonephritis akut dan kronik, pyelonephritis, nefropati hamil, dll.) Atau saluran kencing (keradangan pundi kencing, prostat, ureter). Proteinuria buah pinggang boleh menjadi organik (glomerular, tiub dan berlebihan) dan berfungsi (proteinuria febrile, ortostatik pada remaja, apabila bayi berlebihan, pada bayi yang baru lahir). Proteinuria berfungsi tidak dikaitkan dengan patologi buah pinggang. Jumlah harian protein bervariasi pada pesakit dari 0.1 hingga 3.0 g atau lebih. Komposisi protein air kencing ditentukan oleh elektroforesis. Penampilan dalam air kencing protein Bens-Jones adalah ciri myeloma dan Waldenstrom macroglobulinemia, # 223; 2 mikroglobulin dalam kes kerosakan pada tubulus buah pinggang.

Protein normal dalam air kencing tidak praktikal (kurang daripada 0.002 g / l).

Tanda-tanda utama penyakit yang dikesan dalam kajian air kencing.

SG Berat tertentu. Pengurangan dalam berat badan tertentu menunjukkan pengurangan keupayaan buah pinggang untuk memusatkan air kencing dan membuang toksin daripada badan, seperti kes kegagalan buah pinggang. Peningkatan berat badan tertentu dikaitkan dengan sejumlah besar gula dalam air kencing, garam. Perlu diingatkan bahawa adalah mustahil untuk menilai graviti spesifik untuk hanya satu ujian air kencing, mungkin terdapat perubahan rawak, perlu mengulang analisis air kencing 1-2 kali.

Protein Protein dalam air kencing - proteinuria. Penyebab proteinuria boleh merosakkan buah pinggang sendiri dalam nefritis, amyloidosis, dan kerosakan oleh racun. Protein dalam air kencing juga boleh muncul disebabkan oleh penyakit saluran kencing (pyelonephritis, cystitis, prostatitis).

Glukosa Glukosa (gula) dalam air kencing - glycosuria - selalunya disebabkan oleh kencing manis. Penyebab yang jarang adalah kekalahan tubulus buah pinggang. Ia sangat mengganggu jika badan ketone dikesan bersama gula dalam air kencing. Ini berlaku dengan diabetes yang teruk dan tidak senonoh dan merupakan komplikasi komplikasi penyakit kencing manis yang paling teruk - koma diabetik.

Bilirubin, Urobilinogen Bilirubin dan urobilin ditentukan dalam air kencing dalam pelbagai bentuk penyakit kuning.

Erythrocytes Erythrocytes dalam air kencing - hematuria. Ini berlaku sama ada dengan kekalahan buah pinggang sendiri, selalunya dengan keradangan mereka, atau pada pesakit dengan penyakit saluran kencing. Jika, sebagai contoh, batu bergerak di sepanjang mereka, ia boleh mencederakan membran mukus, akan ada sel darah merah dalam air kencing. Tumor buah pinggang yang mereput juga boleh menyebabkan hematuria.

Leukosit Leukosit dalam air kencing - leukocyturia, selalunya akibat perubahan radang dalam saluran kencing pada pesakit dengan pyelonephritis, cystitis. Leukosit sering ditentukan oleh keradangan organ kelamin wanita luar, pada lelaki, oleh keradangan kelenjar prostat.

Silinder Cylinder adalah struktur mikroskopik yang pelik. Silinder hyaline dalam jumlah 1-2 boleh berada dalam orang yang sihat. Mereka terbentuk dalam tubulus buah pinggang, ia tersekat bersama zarah protein. Tetapi peningkatan jumlah mereka, silinder jenis lain (granular, eritrosit, lemak) selalu menunjukkan kerosakan tisu ginjal itu sendiri. Terdapat silinder dalam penyakit keradangan ginjal, lesi metabolik, seperti kencing manis.

Kaedah yang bermaklumat dan hadnya. Kandungan maklumat ujian air kencing umum untuk pengiktirafan penyakit tertentu buah pinggang adalah rendah, biasanya memerlukan kajian tambahan dan lebih tepat. Tetapi penyelidikan sangat penting, terutamanya apabila menjalankan kajian pencegahan, kerana ia membolehkan untuk mengenal pasti tanda-tanda awal penyakit buah pinggang. Ia juga diketahui bahawa sering penyakit buah pinggang tersembunyi, dan hanya kajian kencing membolehkan mereka mengesyaki dan menjalankan pemeriksaan yang diperlukan lagi.

Di kebanyakan makmal, ketika memeriksa air kencing untuk protein, gunakan reaksi kualitatif pertama yang tidak mengesan protein dalam air kencing seorang yang sihat. Jika protein dalam air kencing dikesan oleh tindak balas kualitatif, penentuan kuantitatif (atau separuh kuantitatif) dijalankan. Pada masa yang sama, ciri-ciri kaedah yang digunakan meliputi spektrum yang berbeza uroprotein adalah penting. Oleh itu, apabila menentukan protein menggunakan 3% asid sulfosalicylic, jumlah protein dianggap normal sehingga 0.03 g / l, manakala menggunakan kaedah pyrogallol, had nilai protein biasa meningkat kepada 0.1 g / l. Dalam hal ini, dalam bentuk analisis adalah perlu untuk menunjukkan nilai normal protein untuk kaedah yang digunakan oleh makmal.

Apabila menentukan jumlah minimum protein, disarankan untuk mengulangi analisis; jika ragu-ragu, kehilangan protein harian dalam air kencing harus ditentukan. Urin harian biasa mengandungi protein dalam kuantiti yang kecil. Di bawah keadaan fisiologi, protein yang ditapis hampir sepenuhnya diserap oleh epitel tubulus proksimal dan kandungannya dalam jumlah harian urin berbeza mengikut pengarang yang berlainan daripada kesan hingga 20 50, 80 100 mg dan sehingga 150 hingga 200 mg. Sesetengah penulis percaya bahawa perkumuhan harian protein dalam jumlah 30 50 mg / hari adalah norma fisiologi untuk orang dewasa. Lain-lain percaya bahawa perkumuhan protein kencing tidak boleh melebihi 60 mg / m2 permukaan badan setiap hari, tidak termasuk bulan pertama kehidupan, apabila nilai proteinuria fisiologi dapat empat kali lebih tinggi daripada nilai yang ditentukan.

Keadaan umum untuk penampilan protein dalam air kencing seseorang yang sihat adalah kepekatan mereka yang agak tinggi dalam darah dan berat molekul tidak melebihi 100,200 kDa.

ini bukan perkara biasa, dengan diagnosis anda mungkin, satu lagi ialah untuk sindrom nefrotik sebenarnya penunjuk kecil.. melihat klinik - bengkak, tekanan, dll, terus mengambil rawatan yang ditetapkan..

dan lagi saya akan berkata: TIDAK normal!